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Elabscience葉酸/維生素B9(FA/VB9)ELISA試劑盒的原理與注意事項有什么?

 更新時間:2023-12-28 點擊量:742

Elabscience葉酸/維生素B9(FA/VB9)ELISA試劑盒是用于體外定量檢測血清、血漿或其它相關生物液體中FA/VB9濃度的,那么你知道Elabscience葉酸/維生素B9(FA/VB9)ELISA試劑盒的原理與注意事項有什么嗎?讓我們一起來看看吧!

一、檢測原理

Elabscience葉酸/維生素B9(FA/VB9)ELISA試劑盒采用競爭ELISA法。用 FA/VB9 抗原包被于酶標板上,實驗時樣品(或標準品)中的 FA/VB9與包被的FA/VB9 競爭生物素標記的抗 FA/VB9 單抗上的結合位點,游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標記的親和素,生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB 在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450 nm波長處測OD值,FA/VB9 濃度與OD450值之間呈反比,通過繪制標準曲線計算出樣品中 FA/VB9 的濃度。

二、注意事項

1) 收集血液的試管應為一次性無內毒素試管。避免使用溶血,高血脂樣品。

2) 樣品收集后若在1周內進行檢測可保存于2-8℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(3個月內檢測),避免反復凍融。在檢測前,冷凍過的樣本應緩慢地融化并離心除去凍融過程產生的沉淀物。室溫混勻后使用。

3) 試劑盒檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍。如果樣品中待測物濃度過高或過低,請對樣本做適當的稀釋或濃縮。

4) 若所檢樣本不在說明書所列樣本之中,建議做預實驗驗證其檢測有效性。

5) 若使用化學裂解液制備組織勻漿或細胞提取液,由于引入某些化學物質會導致ELISA測值出現偏差。

6) 某些重組蛋白可能與試劑盒中捕獲或檢測抗體不匹配而出現不能檢測的情況。

7) 試驗中請穿著實驗服并戴乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液樣品時,請按國家生物試驗室安全防護條例執(zhí)行。

8) 請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素化抗體工作液、酶結合物工作液。未用完的濃縮生物素化抗體(100×)、濃縮HRP酶結合物(100×)、酶標板及其他原液按照上述表格中保存條件存放。

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