技術(shù)文章
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小動物活體成像簡介小動物活體成像早興起于美國哈佛大學(xué),是由Weisslede于1999年提出的一項新興技術(shù),基于分子影像學(xué),對于活體狀態(tài)下的動物在細(xì)胞水平和分子水平進(jìn)行定性以及定量的研究。這種技術(shù)顛覆了以前依賴于肉眼可見的傳成像系統(tǒng),由非特異性成像上升為特異性成像,為疾病研究以及早期診斷提供了良好的技術(shù)支撐。小動物成像原理小動物活體成像涉及生物發(fā)光與熒光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是自發(fā)光,通過熒光素酶基因標(biāo)記細(xì)胞或者DNA,熒光則是通過熒光報告基因(GFP、Cyt等)進(jìn)行標(biāo)記,通過特...
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技術(shù)簡介慢病毒(Lentivirus)載體是以HIV-1(人類免疫缺陷Ⅰ型病毒)為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體,屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科,慢病毒屬,基因結(jié)構(gòu)復(fù)雜,共包含9個基因,其中有3個和單純逆轉(zhuǎn)錄病毒相似結(jié)構(gòu)的基因:gag、pol、env;4個輔助基因:vif、vpr、nef、vpu和2個調(diào)節(jié)基因:tat和rev。該病毒能夠?qū)谢驅(qū)氲揭恍┹^難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,如原代細(xì)胞等,并且將靶基因隨機(jī)整合到宿主的基因組中,可作為一種體外運輸工具,從而大大增加了轉(zhuǎn)染率,同時具有感染分裂期和非分裂期...
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項目內(nèi)容概述RNA干擾(RNAi,RNAInterference)是抵御外來病毒侵犯的一種防御機(jī)制,廣泛應(yīng)用于功能基因組學(xué)、基因治療、靶藥物篩選、細(xì)胞信號通路分析、蛋白質(zhì)互作等領(lǐng)域。具體來說,當(dāng)dsRNA或pre-miRNA進(jìn)入細(xì)胞后,能夠被特異的核酸內(nèi)切酶(Dicer)識別并切割成為很小的片段,這些片段在解旋酶的作用下會解鏈。反義鏈在與體內(nèi)一些酶結(jié)合形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物(RNA-InducedSilencingComplex,RISC),RISC與mRNA同源區(qū)進(jìn)行特...
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同工酶分析介紹同工酶(isoenzyme)是指蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃免疫學(xué)性質(zhì)不同,但是催化的化學(xué)反應(yīng)相同的一組酶。這類酶存在于生物的同一種屬或同一個體的不同組織、甚是不同的細(xì)胞中。同工酶的產(chǎn)生是由于生物進(jìn)化過程中對代謝過程的適應(yīng)。越是關(guān)鍵的代謝調(diào)控酶或與外界環(huán)境密切相關(guān)的酶,同工酶也越普遍,同時分子類型也越多。通過同工酶譜的分析,我們可以研究物種進(jìn)化、遺傳變異、雜交育種、個體發(fā)育差異等多種信息。檢測內(nèi)容利用電泳分析法解析乳酸脫氫酶、超氧化物歧化酶、酯酶、過氧化物酶、酸性...
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